根據科學的手段，我們已經得知光緒皇帝死於砒霜中毒，那必然是遭人毒手，這點是可以確定的，那麼幕後兇手到底是不是慈禧太后呢？如果是她的話，她又為何要這麼做呢？
雖然歷史上也有人服食砒霜自殺。但光緒作為清朝的皇帝，一直以來只是個名義上的統治者，心裡早就憋著一股火。眼看慈禧快不行了，終於自己要熬出頭了，是時候讓他執掌實權了，他肯定是沒有理由在這個時候自殺的，所以他一定是被人下毒的。
作為皇帝，光緒一直被囚禁在瀛臺孤島，過著與世隔絕的生活，衣服食物都是人送的。如果宮內食物中誤放了砒霜，這也是不可能的，所以必然是有人故意為之。
毒死光緒的人是誰？慈禧的可能性最大。她對光緒那麼差，在生命的盡頭，一定擔心死後被光緒報復。於是偷偷派人在光緒的食物裏放了一點砒霜，神不知鬼不覺的弄死光緒，也是正常操作。她既有動機也有能力去辦這件事情，但沒什麼實際證據可以證明是慈禧派人幹的，一切都只是假說。僅憑此推斷就斷定慈禧毒死光緒，未免過於武斷。因為其他人同樣也有作案動機和手段。
比如慈禧身邊大大小小的宦官，都是拜高踩低慣了的，對失勢的傀儡光緒皇帝肯定沒有好臉色，說不定還一直欺負他。慈禧太后馬上就要嗝屁了，等到光緒掌握實權了，這些欺負過他的太監們能過上好日子嗎，說不定自己的小命都要不保。乾脆一不做二不休，找個機會把砒霜放在病了很久的光緒的食物裏，讓人誤以為光緒得了重病死了。反正慈禧也看光緒不爽，光緒的真正死因，宮裏不會有一個人在乎或者追究。
晚清很多宦官在宮外都有私宅，可以自由出入紫禁城。得到像砒霜這樣的毒藥並不困難。拿到藥之後，假裝遇到送飯的小太監：“讓我看看，有什麼好吃的可以給皇上吃？”，順便投個毒什麼的，還不是輕而易舉的事情。
歷史上强大的張飛曾經鞭打兩個部下，部下們趁他酒醉睡覺直接要了命。所以說，一個大人物意外死在一個小人物手裡，也不是什麼很難發生的事情。慈禧是光緒之死的最大嫌疑人。但是沒有確切的證據，是不能給慈禧定罪的。