養豬場非洲猪瘟變異株監測科技指南
國家非洲猪瘟參攷實驗室
為指導養豬場做好非洲猪瘟監測工作,及時發現非洲猪瘟病毒特別是變異株感染情况,提升非洲猪瘟防控能力,特製定本科技指南。
一、非洲猪瘟變異株的定義
非洲猪瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等,與2018年傳入的非洲猪瘟毒株相比,該類毒株的基因組序列、致病力等發生明顯變化。活豬感染該類毒株後,潜伏期延長,臨床表現輕微,後期可出現關節腫脹、皮膚出血型壞死灶,感染母猪產仔效能下降、死淘率增高,出現流產死胎/木乃伊胎等。與傳統的流行毒株相比,活豬感染該類毒株後排毒滴度低、間隙性排毒,難以早期發現。
二、監測方法
(一)加强臨床巡視
時刻關注豬場各個環節豬只异常情况,想方設法提升飼養人員責任心,一旦發現豬只出現嗜睡、輕觸不起、采食量减少,發熱、皮膚發紅、關節腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸,育肥猪死淘率增高,母猪流產或出現死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現時,應第一時間採樣檢測。
(二)改進主動監測
每週對豬群進行病原和抗體檢測。在豬群進行疫苗接種、轉群、去勢,或母猪分娩後,應進行採樣檢測。豬場出現風險暴露或周邊豬場出現感染時,按需進行採樣檢測。
(三)抽樣策略
對可疑猪的同舍和關聯舍豬群,採集深部咽拭子和抗凝血,進行病原檢測,必要時採集血清進行抗體檢測。對可疑猪及臨近猪接觸的地面、欄杆,以及舍內人員接觸的物品等,採集環境樣品進行病原檢測。病原檢測如果混檢,建議混樣數量不超過5個;抗體檢測不得混樣。
(四)樣品選擇
對可疑猪,按檢出概率高低排序,依次採集深部咽拭子、淋巴結(微創採集)、前腔靜脈抗凝血(EDTA)或尾根血、口鼻拭子。
對分娩母猪,應採集臍帶血、胎衣;對死胎和流產胎兒,應採集淋巴結、脾臟等組織樣品。
對病死猪,優選採集部位為淋巴結、脾臟、骨髓和肺臟。
血清樣本,按常規方法製備。
三、檢測方法
(一)病原檢測方法
採用非洲猪瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重螢光PCR方法檢測核酸,詳見“農辦牧〔2020〕39號”附件《非洲猪瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測規範》。必要時可測序鑒別。
(二)抗體檢測方法
採用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測抗體水准,詳見《非洲猪瘟診斷技術》(GB/T 18648)。
(來源:農業農村部)