鴨病毒性肝炎(DVH)主要是3~20日齡的雛鴨發病,臨床症狀以發病急、死亡快,死前呈角弓反張姿態和病鴨肝臟腫脹,表面有出血斑點為病變特徵的病毒性傳染病。現就接種雞卵黃液防治鴨病毒性肝炎試驗介紹如下。
某縣年出欄肉鴨2000萬只以上,鴨群DVH發病率高,死亡多,經濟損失很大。現將試用雞作為免疫蛋源,製備DVH卵黃抗體,臨床試用效果良好,茲介紹於下。
一、試驗資料與方法
1、高產蛋雞的選擇
選擇健康高產母雞30只,隔離飼養,加强飼料營養和預防細菌感染,觀察1周,正常時即接種疫苗。
2、DVH弱毒疫苗
由江蘇農科院近期生產,-15℃冷凍保存。
3、DVH肝組織上清液油劑滅活苗製備
制水相:無菌手法,取新鮮且具有DVH典型病變的肝臟,除去膽囊、稱重、剪碎,按1∶3比例,用生理鹽水稀釋搗碎裝入瓶中,加雙抗,置冰柜反復凍融3次,離心,取上清,再加入肝組織,按上述方法處理,取其上清液(保留200ml凍存備用),加0.5%福馬林(分析純)混勻,於37℃條件下滅活24h,即可達到滅活目的,再加入4%吐溫~80,高速攪勻5min,裝瓶,即為水相。
制油相:取10號白油和司本DA96∶4混合加入2%硬脂酸鋁,高壓滅菌後即為油相。
制油苗:以油相與水相3∶1;的比例,先高速攪勻油相3min,然後逐漸加入水相,邊加邊混,至加完水相後再高速(10000轉/min)攪拌3min,檢驗:靜置72h或3000轉/min離心不分層,判為合格。
4、卵黃抗體的製備
準備高免蛋:將DVH弱毒苗,用生理鹽水稀釋,每只以2倍量飲水接種疫苗,之後於第10d和20d分別接種上述DVH油劑滅活苗2ml和4ml,注射後25d開始留蛋,留取20d的高免蛋,消毒備用。
製備孵黃抗體:將消毒過的高免蛋無菌法分離出卵黃,按1∶3比例用生理鹽水稀釋,勻漿過濾,加雙抗冷凍保存。
二、安全試驗和保護試驗
1、安全試驗
給5日齡雛鴨頸背部皮下注射卵黃抗體1~2ml,隔離飼養觀察10d,其精神、食欲、糞便均無明顯异常。
2、保護試驗
隨機抽出5日齡雛鴨20只,其中10只為試驗組,另10只為對照組。2組均皮下注射上述肝組織上清液0.5ml,分別隔離,同條件下飼養。24h後對試驗組,皮下注射卵黃抗體1ml,飼養觀察14d。
3、結果
試驗組的雛鴨均健活。而對照組雛鴨分別於接種肝毒液後,於第4、5d,分別死亡4只和5只,餘1只,精神不振,食欲減退,僅能飲少量水,至第9d衰弱而死,死亡率100%。實驗組由於注射了卵黃抗體而獲得了保護,相對於對照組,保護率100%。
三、防治效果
1、預防
我縣安國鎮張某,養肉仔鴨每批2000只,而每批都發生過DVH,死亡10%以上,用其他藥物防制、效果不够理想,使用我們提供的卵黃抗體預防,3~5日齡雛鴨皮下注射卵黃抗體1ml/只,於10d後再注射1次,照和此方法預防3批,均未發病。
2、治療
2003年4月13日上午,朱寨鎮孫某飼養的1500只13日齡肉鴨發生了死前背頭症狀、剖檢肝臟具有明顯的出血斑點,膽囊腫大,腎臟充血,呈斑駁狀,胰臟腫大,臨床診斷DVH病,已死亡12只,即用卵黃抗體皮下注射2ml,當天死亡21只,次日早上即停止死亡。之後對王店村劉某等4戶所養的6400多只雛肉鴨DVH病進行了治療,也獲得較滿意的效果。
3、討論
給雞接種鴨DVH肝毒油劑滅活苗,强化免疫,能獲得相應特异性卵黃抗體,防治鴨DVH病,具有良好的效果,也能避免應用同源蛋黃液可能帶來的疫病傳播。
對於卵黃抗體和肝組織上清液的效價,可進行中和試驗等方法檢測,但受條件限制,未能測定,有待進一步試驗。